

钙离子荧光探针Rhod-2, AM 纯 CAS 145037-81-6
产品名称: 钙离子荧光探针Rhod-2, AM 纯 CAS 145037-81-6
英文名称: Rhod-2, AM *UltraPure Grade*
产品编号: 21064
产品价格: 电询
产品产地: 美国
品牌商标: AAT Bioquest
更新时间: 2025-06-13T11:31:21
使用范围: null
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产品优势
1.低背景荧光:与Ca²⁺结合后显著增强荧光信号,能有效降低背景干扰,提高检测灵敏度。
2.适用范围广:通过荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱分析和荧光酶标仪等,监测细胞内游离Ca²⁺浓度的动态变化
3.线粒体靶向性:通过膜电位依赖富集于线粒体中,避免与其他细胞器(如内质网)交叉标记
产品介绍
钙离子检测在众多生物学研究中至关重要。能够与Ca²⁺结合并产生光谱响应的荧光探针,使研究人员得以通过荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱分析和荧光酶标仪等技术手段,监测细胞内游离Ca²⁺浓度的动态变化。对于存在较强自发荧光的细胞和组织样本,长波长钙指示剂Rhod-2可作为Fluo-3的理想替代选择。其中Rhod-2 AM是该探针的细胞膜渗透性衍生物。
实验方案
溶液配制
1.储备溶液配制
Rhod-2 AM 储备溶液
在无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM Rhod-2 AM 储备溶液。
2.工作溶液配制
Rhod-2 AM 工作溶液
1.实验当天,将 Rhod-2 AM 溶解在 DMSO 中,或将等份指示剂储备溶液解冻至室温。
2.选择合适缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)配制2-20 µM Rhod-2 AM工作液,并添加0.04% Pluronic® F-127表面活性剂。对于大多数细胞系,推荐使用4-5 μM终浓度的Rhod-2 AM。具体染料加载浓度需通过实验优化。
注意:非离子型表面活性剂 Pluronic® F-127可增强Rhod-2 AM水溶性。可以从百萤购买购买。
注意:若细胞存在有机阴离子转运体,可在工作液中添加1-2 mM丙磺舒(孔板内终浓度0.5-1 mM)以减少水解后染料的外漏。各种 ReadiUse 丙磺舒产品,包括水溶性、钠盐和稳定溶液,均可从百萤购买。
操作步骤
以下是推荐的Rhod-2 AM加入活细胞的方案。 该方案仅提供指南,实际应根据您的特定需求进行修改。
1.将细胞在生长培养基中培养过夜。
2.次日,将 1X Rhod-2 AM 工作溶液添加到细胞孔板中。
注意:如果您的化合物干扰血清,请在上样前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。
3.将载有染料的孔板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 30 至 60 分钟。
注意:部分细胞系延长孵育时间至1小时以上可增强信号强度
4.用 HHBS 或您选择的缓冲液(包含阴离子转运蛋白抑制剂,例如 1 mM 丙磺舒,如果适用)替换染料工作溶液,以去除任何多余的探针。
5.根据需要添加刺激剂,同时使用配备 TRITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统(例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation)的荧光酶标仪在 Ex/Em = 540/590 nm 处进行荧光监测。